前言

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局，國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布即將實(shí)施的食品中乙酰磺胺酸鉀的測(cè)定方法，該標(biāo)準(zhǔn)適用于乳及乳制品，冷凍飲品、水果制品、蔬菜制品、食用菌和藻類(lèi)、豆類(lèi)制品、堅(jiān)果與籽類(lèi)、糖果、糧食制品、焙烤食品、調(diào)味品、飲料、酒類(lèi)、果凍中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定。

本實(shí)驗(yàn)參考標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.140-2023 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定》，使用EZsep™AL-N固相萃取柱進(jìn)行樣品凈化，高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，建立了一種對(duì)果汁中乙?；前匪徕浀姆治龇椒?。

1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.1 儀器與試劑

LC-20AD液相色譜儀，島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司；

MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置，貨號(hào)：PZ0008，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；

EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號(hào)：PZ11423，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；

冷凍離心機(jī)，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學(xué)儀器廠；

甲醇（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；

乙腈（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；

硫酸銨（分析純），購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

水中安賽蜜溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，1000μg/mL，壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取水中安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1mL，用水稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的色素混標(biāo)中間液。

分別移取10μg/mL的色素混標(biāo)中間液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5用水稀釋至1.0mL容量瓶中，得到濃度分別為0.1、0.2、0.5、1、2、5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3 實(shí)驗(yàn)部分

準(zhǔn)確稱(chēng)取果汁試樣5.0g，置于50mL具塞離心管中，先加入20mL水，渦旋1min,超聲提取20min，10000r/min離心5min，上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，再向離心管中加水20mL，混勻后超聲5min并離心。合并上清液,用水定容至刻度，混勻。準(zhǔn)確吸取提取液5mL，作為待凈化液，待凈化。

將EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號(hào)：PZ11423，分別以10mL乙腈、10mL水活化后，取待凈化液上樣，收集流出液。分別用2mL甲醇-乙腈-硫酸銨溶液(5+10+85)洗脫液洗滌固相萃取柱2次，收集流出液，合并3次流出液，并用洗脫液定容至10mL，混勻，用PTFE微孔濾膜過(guò)濾，高效液相色譜測(cè)定。

1.4 LC分析

色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；

流動(dòng)相：A:0.02mol/L硫酸銨溶液 B:甲醇；

流速：1.0mL/min；

檢測(cè)波長(zhǎng)：227nm；

進(jìn)樣量：10μL。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫表

2、       實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 加標(biāo)回收率結(jié)果

圖1 乙?；前匪徕洏?biāo)準(zhǔn)色譜

圖2 樣品空白標(biāo)準(zhǔn)色譜

圖3 樣品加標(biāo)色譜圖

3、結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)使用EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號(hào)：PZ11423，北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司，對(duì)肉果汁中乙酰磺胺酸鉀進(jìn)行測(cè)定，其加標(biāo)回收率范圍在89.4%~100.3%之間，RSD為4.7%。準(zhǔn)確性和精密度均滿足GB 5009.140-2023要求，且實(shí)驗(yàn)方法穩(wěn)定、可靠。

4、參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.140-2023 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乙酰磺胺酸鉀的測(cè)定